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03-192026

兩種細菌對斑節(jié)對蝦免疫和DNA甲基化相關基因表達的影響

汪麗婷1,2黃建華1,3周發(fā)林1,3李運東1,3姜松1,3楊其彬1,3江世貴1史健志1,3丁陽陽1,3楊麗詩1,3

1.中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院3.三亞熱帶水產(chǎn)研究院

摘要：明確斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)應對細菌感染的免疫應答機制及其表觀遺傳調控特征，可為病害防控策略提供重要理論支持。本研究通過體內(nèi)注射革蘭氏陰性菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、革蘭氏陽性菌糞腸球菌(Enterococcus faecalis)和磷酸鹽緩沖液(PBS)，探討了兩種細菌對斑節(jié)對蝦組織學、免疫能力和DNA甲基化水平的影響。采用肝胰腺和鰓組織切片觀察及實時熒光定量PCR(qRT-PCR)進行分析。蘇木精-伊紅(HE)染色結果顯示，副溶血弧菌感染后，斑節(jié)對蝦肝胰腺小管上皮細胞脫落，同時鰓絲收縮；注射糞腸球菌后，肝胰腺小管細胞出現(xiàn)壞死，鰓組織多發(fā)生水腫、出血現(xiàn)象。qRT-PCR結果表明，兩種細菌刺激后均能顯著上調抗菌肽基因(Crustin)和熱休克蛋白70基因(Hsp70)的表達；且脂多糖-β-1, 3-葡聚糖結合蛋白基因(LGBP)在鰓組織中顯著上調，脂肪酸結合蛋白基因(Fabp)在肝胰腺組織中顯著上調。感染兩種細菌均能顯著上調肝胰腺和鰓組織中的甲基化CpG結合蛋白2基因(MBD2)、泛素樣含植物同源結構域和環(huán)指結構域1基因(UHRF1)和DNA甲基轉移酶2基因(DNMT2)的表達水平，但副溶血弧菌的刺激效果更明顯。研究表明，斑節(jié)對蝦的免疫基因及DNA甲基化相關基因在副溶血弧菌和致病性糞腸球菌的侵染下均顯著上調表達，證實這些基因通過調控宿主生理功能在抗感染防御中發(fā)揮關鍵作用。還原

關鍵詞：

斑節(jié)對蝦;副溶血弧菌;糞腸球菌;組織學切片;免疫相關基因;DNA甲基化相關基因;

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